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最近在做GST标签蛋白过柱,用的是天地人和的GlutathineBeads重力柱,蛋白带上GST101KD

相关实验:用于蛋白质表达的标签实验

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dxy_yzlp1qx5

但是有大量蛋白在流出液里,洗脱液里丽春红染色都看不到,怀疑蛋白挂柱挂不上。用的是5ml填料规格的柱子,样品是裂解完放4℃第二天过柱的(第二天可以看到有沉淀,重悬后大部分溶解,小部分仍沉淀),大概15ml,4℃重复过柱3遍,平衡液洗杂液洗脱液都是按照说明书配的

园子里看到说如果蛋白不挂柱可以样品孵育过夜,但是我的柱子里面的填料买回来是固定在底部的,像这样的柱子可以把样品加进去4℃过夜第二天来洗脱吗?由于填料固定,填料上方的样品会与填料结合不充分吗?

还有请问洗脱液中的谷胱甘肽可以提前配储存液吗?还是说也要现用现配?

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2 个回答

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土井挞克树

有帮助

最好是现用现配,配好的容易产生沉淀。

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huarenqiang5

有帮助

洗脱液中的谷胱甘肽建议现用现配比较好。

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