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用于蛋白质表达的标签实验

实验分类:

蛋白质实验

最新修订时间:

简介

大多数蛋白质都是利用重组表达技术进行制备的。在克隆的过程中,可以将额外的残基或标签添加到目标蛋白质的 N 端或 C 端。这些标签的长度可以从仅仅几个氨基酸残基到全长的蛋白质或结构域,它们可以提高目标蛋白质的产量或者赋予目标蛋白质新的特性,这些特性可以用来对目标蛋白质进行鉴定或者对目标蛋白质进行研究。

来源:丁香实验

操作方法

用于蛋白质表达的标签实验

一、设计具有标签的蛋白质时需要考虑的因素 亲和力和可溶性的选择 在大肠埃布氏菌中生产外源蛋白时面临两个挑战: 一? 是所用蛋白质表达系统的表达水平很低; 二是所表达的蛋白质被错误折叠进不溶性的聚集体—包涵体中。弱启动子、低转录起始或稀有密码子的存在引起的表达问题都可以通过在装配过表达质粒时将矫正序列(correctivesequence) 引入基因中和使用补充了稀有 tR

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