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最新融合表达的亲和纯化小标签StrepTaq

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在重组蛋白纯化的过程中,研究者常常利用融合表达的各种亲和标签,通过一步法亲和纯化的方法获得自己的目的蛋白。其中,6×His•Tag标签因其氨基酸个数少、对蛋白活性影响较小、亲和纯化方便,成为大家常用的选择。但是,His Tag并非万能标签,依然有不少使用限制因素,如:对重金属离子敏感、不适合金属离子螯和层析方法的蛋白;活性不稳定的蛋白;对蛋白纯度要求更高等。所以,研究人员仍然需要不断寻找更适合自己的亲和标签。

Novagen最新推出的Strep•Tag II 8氨基酸小标签,就是一个新选择。我们早已熟知biotin和streptavidin之间能够高度特异的结合,这种特异性结合早已广泛用于免疫或者非放标记反应中。

Novagen模拟Biotin设计了一个8个氨基酸的小标签Strep•Tag II,正好能特异的结合到streptavidin上,又再改造优化streptavidin与小标签的结合位点,使之与Strep•Tag II融合标签的结合力超出普通streptavidin约100倍,称为Strep•Tactin蛋白。当表达产物经过Strep•Tactin亲和纯化柱时,融合表达Strep•Tag II的融合蛋白高特异地结合在亲和柱上,经过反复洗涤杂蛋白后,可以用一种生物素的类似物――2.5 mM脱硫生物素,在温和的PBS或者其他生理条件缓冲系统就能彻底洗脱目的蛋白,温和条件有助于保持蛋白的活性。

  • 一步法快速亲和纯化,获得高达95%纯度目的蛋白

  • 替代金属离子螯和层析方法,避免重金属离子对蛋白的干扰

  • 洗脱条件温和,保持蛋白活性和空间结构

  • 系列携带Strep•Tag II 融合标签的原核、昆虫、哺乳动物细胞表达质粒,满足各种蛋白表达需要

  • 各种预装柱及配套试剂盒,适合手动及FPLC纯化不同要求

  • 丰富齐全的辅助产品,包括Strep•Tag II融合标签单抗、HRP 耦联单抗、携带 Strep•Tag II 标签的蛋白Marker

各类携带Strep•Tag II融合标签的载体特性
pET-51b(+) pET-52b(+) pIEx-8 pIEx-9 pIEx-10 pTriEx-5 pTriEx-6 pTriEx-7
宿主系统及启动子
E.coli
T7lac启动子

昆虫 细胞
e1/hr5

昆虫细 胞10启动子

哺乳动物CMV
ie启动子/ 增
强子

    
N端特性
信号肽序列
Strep•Tag II
Ek/LIC
位点
3C/LIC
位点
C端特性
Thrombin
位点
His•Tag
复制子
低拷贝ColE1(pBR)
高拷贝ColE1(pUC)
抗性


Introductory Strep•Tag® II Kit, pET-51b货号:71615-3


Introductory Strep•Tag® II Kit, pET-52b货号:71616-3

推荐试剂盒: 分别含pET-51b、pET-52b载体;配套纯化预装柱、缓冲液及检测用抗体。

1

Strep•Tactin Superflow Column 1 ml

120 ml

1X Strep•Tactin Wash Buffer

25 ml

1X Strep•Tactin Elution Buffer

120 ml

1X Strep•Tactin Regeneration Buffer

20 ml

Strep•Tag II Antibody, HRP Conjugate

10 mg

pET-52b(+) DNA

0.2 ml

Induction Control D

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