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【求助】用带GFP标签的microRNA质粒能用于luciferase实验吗?

丁香园论坛

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我构建了个microRNA的带GFP标签的质粒,不知道能不能与目的基因的3’UTR luciferase报告载体共转来检测luciferase的活性?
这个实验还要谨慎考虑一下,GFP的绿色荧光可能会干扰luciferase检测结果。

另外你说的microRNA带GFP标签,你要保证两个东西都要有表达且保持活性,建议你最好把这两个东西构建成两个转录单位,由两个启动子分别起始两个东西的转录,
其实这个是可以的,我们就有师兄这么做,因为GFP与luciferase不同之处是GFP需要激发波,而GFP需要激发,再说他们的波长也是不一样的。要严格的说影响,可能会存在,但是做出来的结果好象影响不大。仅供参考!
不会,两者的激发波长不一样
luciferase是自发荧光
GFP是激发荧光
多谢大家!!!
是可以的,没有问题。
我刚刚也遇到了这个问题,打电话给PROMEGA的技术支持,他明确说可以用,没有问题。

本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你,都可以成为师兄的好伙伴

师兄微信号:shixiongcoming

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