dxy_suv75yu2
内参都没了😭😭😭😭
bamboopiggy
你加了蛋白酶抑制剂以后,收的蛋白是怎么保存的?有没有反复冻融?
dxy_suv75yu2
-20度保存的 一部分-80度分装保存的 有大概4,5次反复冻融
NatureBios
按照SOP操作,即使降解,内参或多或少还是会有些印迹的,可以向师兄师姐借一些没有问题的样本,做个预实验看看内参抗体是不是失活了,蛋白降解是蛋白水解酶的酶促反应,通常很迅速,我们可以多熟悉操作流程,如冰浴裂解,蛋白酶浓度合适等细节,加油,
毛利小五郎的徒弟
蛋白抑制酶加的太少,或者蛋白抑制酶失效,或者时间太短