蛋白酶抑制剂
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问:请教一个实验问题,PMSF,胃酶抑制剂以及DTT会不会影响HRP活性?要做ELISA,样品中不知道可不可以加复合蛋白酶抑制剂?请大牛指教!
答:不会影响酶活性,因为蛋白酶抑制剂,抑制的是蛋白水解酶活性。而HRP不是蛋白酶类,而是过氧化酶。(不过dtt肯定会破坏HRP)。即使会影响酶活性,实际上做elisa也不影响,因为加样品和加hrp是分开的,不存在。
答:我在研究各种抑制剂对L-氨基酸氧化酶酶活性的抑制作用的时候,测定L-氨基酸氧化酶活性的体系含有HRP。我们首先用各种抑制剂对HRP水解过氧化氢的作用做了试验,以排除抑制剂可能是对HRP起作用而不是L-氨基酸氧化酶。我们发现PMSF,EDTA(10 mM) 不抑制HRP,而DTT(1 mM)完全抑制HRP。
答:搜集的一点资料与大家共享蛋白酶及其抑制剂。