做WB杂交检测一个比较大的蛋白的表达量，需要跑很久吗

电泳时间：选择分子量最大的预染MARKER，用250kd，然后在电泳槽周围堆满冰，120ma使劲跑吧，跑两个小时换一次电泳液，一直跑到250kd的MARKER，离开胶释放到电泳液中，大概要用5个小时。这时候400kd的蛋白在离开浓缩胶边缘0.5~1cm的地方。

很有必要的，首先大分子在电场下的迁移速度很慢，电泳的分离胶和转膜电流时间相应的都需要根据目的蛋白的大小调整，在我们还不是很清楚的时候，要根据SOP一步步的做，这样能减少出错的概率

增加转膜时间，分子量较大的蛋白要完全转到膜上需要更长的时间。需要注意一下