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CoIP选用什么蛋白标签比较好,为什么?蛋白标签的碱基序列是什么?

相关实验:免疫共沉淀(Co-IP)

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4 个回答

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徐彩云6

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选GST-Tag,主要优点:

1、增加外源蛋白的可溶性;

2、可在不同的宿主中表达,适用范围广;

3、可用不同的蛋白酶可以方便去除;

3、很好保留了蛋白的抗原性和生物活性,提高外源蛋白的稳定性;

4、高特异性,纯化方便且温和;

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汤姆卜丽波

有帮助

比较常用的有Flag标签,序列是(DYKDDDDK )

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huarenqiang5

有帮助

His标签被认为是蛋白纯化的首选标签,它是由六个组氨酸残基(HHHHHH)组成的融合标签,分子量极小只有~0.84KD,可插入在目的蛋白的C末端或N末端。组氨酸残基侧链与固态的镍有强烈的吸引力,可用于固定化金属螯合层析(IMAC),对重组蛋白进行分离纯化。

特点:

1. N-端的His-Tag与细菌的转录翻译机制兼容,有利于蛋白表达;

2. 采用固定化金属离子亲和层析纯化His-Tag融合蛋白操作简便;

3. His-Tag对目的蛋白本身的特性几乎没有影响,不易形成二聚体,从而影响蛋白特性

4. His-Tag非常小,不会改变目的蛋白自身的可溶性;

5. His-Tag极小,再融合蛋白结晶后对蛋白结构没有影响。

6. His-Tag免疫原性相对较低,可将纯化的蛋白直接注射动物进行免疫制备抗体。

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土井挞克树

有帮助

我一般选择c-Myc标签,他的识别能力强

序列是EQKLISEEDL

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