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为什么做COIP的时候 IP组会有多条条带?

相关实验:免疫共沉淀(Co-IP)

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周娇凤

1:HA拉Flag

2:Flag拉HA

3:IgG

IP和WB用了不同种属的抗体

为什么IP组出现了多条条带呢?求大神解答!

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3 个回答

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balalaLy

有帮助

我用ip的抗体去做wb,互作的蛋白也是用的同种属的抗体,出来的条带除了目的蛋白之外就只有轻重链的条带,所以应该不是抗体种属的问题

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小小小小小芳

有帮助

加入的A蛋白抗体和IgG 抗体,在最后一步的煮样中,被β巯基乙醇破坏了结构,变成了重链和轻链,随后由于A蛋白抗体和你的B蛋白抗体种属来源相同,又被你的B蛋白抗体识别出来,所以显影就出现了条带。

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周娇凤user-title

A蛋白和B蛋白的种属是不同的 (IP和WB用的不同种属的抗体)所以为什么有条带呢?

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毛利小五郎的徒弟

有帮助

多条带可能是两个互作蛋白的亲和力较弱

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