WB曝光后背景噪点太高，求大家指点

背景噪点高是由于

① 膜封闭时间不够，室温下通常摇床孵育膜 1h，出现这种情况可以更换合适的封闭液或者适当延长封闭的时间；

② 抗原抗体免疫过程中一抗稀释度太高，可以多设置几组一抗浓度，摸索最适宜的抗体稀释度；

③ 在整个实验过程中膜发生干燥或手套反复接触过也会发生背景值高的情况，因此实验过程中要注意保持膜的湿润，使用镊子夹取膜。

降噪可以通过延长封闭时间，选择合适的封闭孵育体系(bsa milk 市售抗体封闭和稀释液)，增加清洗次数，自己配置的封闭液等要充分溶解

背景高的原因挺多的，从一抗的特异性，蛋白的丰度，封闭液的问题。