为什么wb跑出条带所在位置与说明书的分子量大小不符？差别大，该怎么解决

• 首先，SDS-PAGE电泳时分子量marker不能作为绝对标准，只是一个参考值。
• 其次，有的蛋白（如组蛋白和一些易形成dimer的蛋白，还有一些比较难变性而又形成紧凑的球形结构的蛋白）在用常规方法电泳时会出现异常行为（表观分子量与实际分子量不符）

蛋白印记不一致，蛋白有多重翻译后修饰，也有可能是样本降解等情况，根据数据库和文献是否有修饰，样本制备过程是否导致降解，后面设计蛋白样本时，可以按照抗体说明书加上一个阳性参照

细胞传代次数过多，使其蛋白表达不同，导致检测条带大小与预期不符或多带现象。可通过如下建议解决：使用原始未传代的细胞株，和现在的细胞株一起做平行对照实验。2蛋白样本降解，导致检测蛋白质分子量降低或多带现象。可通过如下建议解决：在样品缓冲液中加入足量的蛋白酶抑制剂。3体内表达的蛋白样本具有多种修饰形式如乙酰化、甲基化、烷基化、磷酸化和糖基化等，导致检测条带大小与预期不符或多带现象。