WB转膜结束后25kd以下的地方总出现粉红色染料印记，请问是怎么回事？另外如何提高心脏组织蛋白提取质量？

各位战友，我的目的蛋白是19kd的，我用心脏组织跑了好几次，都跑不出来，条带很丑(每个泳道都是V字型，而且每次转膜后在25-35kd以下的地方都会留下形态不规律的染料印记)，我用的是弗德的5×loading buffer。今天用体外心肌细胞和组织跑了一次(同一张PVDF膜，一样的操作和条件)，细胞的结果就很好。我师兄说是因为组织提蛋白本来就杂质多比较脏，

想请教广大战友加几个问题：①如何提高提心脏组织蛋白的质量；②转完膜之后，每次在25kd以下的位置都会出现相似的不规则染料印记(我用的弗德的5×loading buffer)，是怎么回事？查阅弗德的说明书，说是双色染料，这种粉红色的染料应该叫“派洛宁y”

附上我今天跑的WB，一个19kd的蛋白，第一个是组织的；第二个是心肌组织电泳转膜并剪膜时候的条带(marker为15和25kd)；第三个为细胞的