秋秋欣欣
将至少3种不同体积的病毒上清稀释液按计划加入至50 mL的Sf9和Sf21昆虫细胞培养体系中。在0, 24, 48,及72小时时取出固定份数的标准化细胞培养基并对细胞密度、生存能力、及随时间的大小变化进行评估。之后通过免疫蛋白印迹分析最终确定最优的表达条件。
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在病毒复制过程中,首先产生BV,BV核壳产生后通过芽生方式从细胞中释放出来,再感染其它细胞,复制后期产生PDV,PDV核壳产生后在细胞核内获得包膜,再被包被在蛋白质包含体中,直到细胞裂解后才被释放到周围环境中,再感染其它细胞。杆状病毒的基因组为单一闭合环状双链DNA分子,大小为80~160 kb,其基因组可在昆虫细胞核内复制和转录。DNA复制后组装在杆状病毒的核衣壳内,后者具有较大的柔韧性,可以容纳较大片段的外源DNA插入,因此是表达大片段DNA的理想载体。
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