请问我这个是什么情况，敷上一抗以后膜上目的条带的位置可以看见灰色条带，但是扫膜看不到目的条带（内参没问题）

有可能是二抗的问题，建议重试。

这种肉眼可见的灰色条带一般是当蛋白量比较高再加上用超敏显影液时会出现，不知道你的是不是这种情况，如果是的话可以换用普通的显影液或者把超敏显影液稀释一下

是不是加错抗体了，一抗加成其他抗体，或者二抗种属加错了，比如兔的加成鼠的；或者ECL发光液失效。另外如果转膜出现了问题，比如膜放反了，也可能出现这种情况

是不是一抗特异性不好，建议采用阴性对照和阳性对照来确定上述哪个条带是目的条带。