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co ip反向互作做不出来怎么解决

相关实验:免疫共沉淀(Co-IP)

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搬砖小兽

A拉B用磁珠做IP实验已经做完,但是B拉A做不出来,同时A会和磁珠非特异性结合,想问下这种情况下是不是可以放弃了,证明没有互作?因为是大论文中的一个实验,所以想求助下各位有经验的师兄师姐们。感激不尽。

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3 个回答

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illusio

有帮助

可能是B的抗体不好用,也可能是两者确实有结合,只是B蛋白的抗原表位被复合物掩盖,可以尝试使用强度高一点的裂解液,破坏部分的空间构想,再试一次

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你好几和户

有帮助

考虑一下是不是磁珠的问题,还有就是外源性的情况下空间结构发生改变或是结合位点发生了改变。

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bamboopiggy

有帮助

你确定A能拉下B来?不是非特异性条带?先试一下把磁珠用bsa封闭一下,然后跟a抗体结合,然后去拉b。反之亦然。

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