求助！请问WB我的条带为什么PLC5显不出Vimentin,Huh7显不出E钙呢？

春日桑1234

2022-07-28

如标题，我跑了两三个月了，细胞也换了好几个批次，但是发现WBplc5显得出E钙但是显不出vimentin,huh7显得出vimentin但是显不出E钙，重复了很多次，上样量拉到了50微克，抗体也稀释到1:500，但是还是解决不了这个问题。我毕业的师姐和楼下的师兄都是这两个细胞显这两个蛋白很好显，没有出现我这种情况，请问有大神知道的吗？救救孩子吧

2 个回答

bamboopiggy

2022-07-29

有帮助

1.首先确定你的细胞确实是plc/prf/5 和Huh7。

2.去找你的师兄师姐要他们的细胞试试。

3.Vimentin 和E-cadherin在不同的细胞，可能位置稍微你差异，你把膜切的大一些试试

Eason老歌迷

2022-07-29

有帮助

有几个问题，可能是细胞表达目的蛋白比较少，可能是你的抗体失效了，或者浓度稀释不对，可能是你的抗体孵育问题。