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PCR跟WB验证同一个靶点问题

相关实验:蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)

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奶茶要喝去冰的

用PCR跟WB验证同一个靶点,这两个方法的结果必须是一样的吗?趋势会不会是相反的呢?相反的话说明什么问题呢?

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5 个回答

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inventbiotech

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结果不一定一致,从转录到蛋白还有很长的路,各种调控,PCR检测mRNA高了,蛋白未必就会高,两种调控系统,当然如果是外源表达的可能一致性还是有的,受内部调控低两者可以一致

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bamboopiggy

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RT-pcr的结果可能无差异,而wb会有差异,但不是结果不能相反

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balalaLy

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我做的第一个课题就有其中一个靶标是这样的,转录水平升高,蛋白水平的乙酰化降低

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Eason老歌迷

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可能它两会不一样哦。可能会相反哦。一个是基因的表达分为转录和翻译两个层面,即mRNA水平和蛋白水平。而真核基因表达的转录和翻译发生的时间和位点存在时空间隔。二个是在转录后,又会有转录后加工,转录产物的降解,翻译,翻译后加工及修饰好几个层面。所以转录水平和翻译水平并不完全一致,且这种调节在不同蛋白质之间存在差异。三个是mRNA与蛋白质的半衰期不同,mRNA极易降解,在组织内存在时间较短,而翻译成蛋白质后性质较稳定。四个是常状态下,细胞内可能存在一定量的蛋白质储备,不行使功能,而这种储备量的多少在不同组织有所不同。

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whilt-shirt

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理论上PCR和WB的结果应该是一致的

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