做WB时，抗体非特异性结合，与哪些因素有关？

一个是抗体浓度问题。一个是抗体和fc受体结合。

1.抗体的质量 2 封闭的程度 3.蛋白的纯度。一般如果有非特异性结合，但是主条带的趋势对，也是可以的。

抗体非特异性结合有两个原因，一是抗体浓度过高，可以稀释，让抗体浓度低，二是没封闭好，建议封闭液用新的，或者现用现配牛奶。