天一湖医者
有个问题,从细菌中提取酶,好象用常规的方法(超声波破壁,缓冲液提取),总是拿不到我要的蛋白。是不是这种蛋白也是疏岁水性较强,需要加助溶剂才能提取出来?另外,是不是也可以加点甘油或者PEG来提取?
Eason老歌迷
既然是提取那肯定是有沉淀和上清,目标蛋白的分子量是应该知道的,那么跑电泳先看它到底是在上清还是沉淀里,剩下的问题你再解决如何提取。对于不同的酶要看酶稳定如何,可以用不同的PH去提取,曾经提取一个酶用水就是提取不出来,需要用盐才能提取出来,多试试,设计个方案,这样才能解决问题,所以不一定加甘油就管用,还得注意破碎本身会不会有问题,倒回去做做也许能找到真正的原因。
dxy_o38ns7o8
可以加入10%甘油,促进溶解蛋白