wb实验bca定量做了之后内参依旧不齐怎么办😶

BCA测定的是组织内总蛋白的量，但是由于组织内细胞类型比较复杂，所以所测定的某一特定蛋白的浓度并不准确，以所测浓度作为参考电泳，若结果内参不齐，可以根据各条带的灰度对上样量做适当调整，也就是调内参。若是细胞样品的话，BCA测定结果就比较准确了，跑出来基本上内参都是齐的。实在不行做标曲。

不论用什么方法进行蛋白定量，都会存在误差，如果定量后上样仍有一些条带差异，可以按照条带强度来调整上样量。实在调不齐就换个内参。

用image j计算灰度值，根据灰度值校准

内参不齐可以适当根据已跑出来的条带灰度进行上样适当调整，一般动物组织蛋白比较麻烦，但是细胞蛋白就很容易跑齐

定量后还不齐，可能是你制备的标准品不够准确，注意看R值越接近1越准确。

那你可以根据你的结果来做适当的调整看看

因为BCA也是有误差的，但是大致趋势可以是一致的，然后你再根据灰度值略微调整一下就可以

最简单就是看哪个少就补点，或者多的减低点。严谨点就做个灰度值，按照灰度值比例增减

那你可以根据你的结果来做适当的调整看看