co-ip的两个问题

位置不同可能是收到了重链的干扰。避免干扰可以使用IPkine二抗，增加Input和IP泳道上样量，减少曝光时间，以及阴性对照IgG使用量建议调整到1ug以下。

使用不同种属的抗体可能有点用，也可以采用特异性识别IgG轻链或者重链的二抗，如目的蛋白与IgG轻链接近、则可采用重链二抗。

实验组拉到的那个位置不同，差多少呢？一般拉到的条带位置要和input差不多才行。用不同的抗体，也无法避免轻重链的识别，但是没事啊，只要能说明问题就好。

位置不对的原因：

1、coip后蛋白条带会迁移是因为在高温的情况下蛋白质之间把对方分开而迁移。2、也可能是因为两个蛋白质有相互作用力。

可以这样使用