dxywode
你的样品是否煮样? IgG的轻链大小25KD,重链大小为50KD,所以很有可能是重链。建议IP抗体和WB抗体使用不同种属来源的一抗。
bamboopiggy
非特异性结合,或者是轻链重链,看你的条带位置
天一湖医者
加入的A蛋白抗体和IgG 抗体,在最后一步的煮样中,被β巯基乙醇破坏了结构,变成了重链和轻链,随后由于A蛋白抗体和你的B蛋白抗体种属来源相同,又被你的B蛋白抗体识别出来,所以显影就出现了条带。
未来9
如果有条带说明目的蛋白与beads本身有结合或与IgG有非特异性结合