WB时，染糖基化，感觉条带整体上移，另一张膜actin位置正常，这是怎么回事？？

目的蛋白存在翻译后修饰，需要查询数据库及文献资料，了解目的蛋白是否存在翻译后修饰，例如磷酸化、糖基化、泛素化修饰等，这些均可能影响条带的位置。

翻译后剪切：许多蛋白首先是以前体形式合成，之后通过剪切形成活性形式，大小也随之改变。例如 Human IL-1β 前体蛋白（precursor），经过 CASP1 酶剪切后，形成 Human IL-1β 蛋白。

目的蛋白可能存在多种异构体（Isoform），同一基因不同的内含子剪接可能产生不同大小的剪切体（Spliced variant），需要查询数据库及文献资料，了解目的蛋白是否有异构体，及是否含有抗体能够识别的表位。

糖基化修饰，是会增大蛋白的分子量，使得条带上移，根据糖基化修饰的多少，上移位置不同，第一次做的时候，建议全膜看一下。

可能是电极不平衡或者加样位置偏斜。

可能是抗体非特异性结合，或者是样品本身存在问题