Eason老歌迷
当然是因地制宜,根据不同的需要选择合适的。
现在一般要自己合成亲和填料,有很多公司都提供活化好的介质,自己偶联就可以,其中比较常用的有溴化氰琼脂糖凝胶,环氧琼脂糖凝胶,氨基琼脂糖凝胶,羧基琼脂糖凝胶,活化酯琼脂糖凝胶,以及巯基琼脂糖凝胶等,但是如果是小分子的配基最好呢选择有3-10碳作为手臂的活化介质为好,此外也曾经有文献报导固定辅酶时,偶联位置不同,选择性有差别,因此可以选择自己适合的活化介质。
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凝胶过滤介质为多孔的网状结构,且生物分子越小进入介质内部越深,故在介质中的停留时间越长。每种介质的孔径都有一定的范围,所以选择凝胶过滤介质的关键在于选择合适的分离范围,其次要考虑介质的机械性能和可放大性。Chromdex系列介质除了具有广泛的分离范围还具有良好的机械性能和可放大性能满足大多数凝胶过滤的需求。对于蛋白质溶液脱盐或者缓冲液置换为目的的应用首选Bestdex G25,由于凝胶过滤技术的分离极限限制,一般需要两种物质的分子量差异在一倍以上时选用凝胶过滤才能得到较好的分离效果。
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不同的活化的介质对偶联的配基有不同的要求,所以要对自己的配基了解比较清楚就可以选择合适的活化介质。
一般在合成的时候大多选择环氧琼脂糖凝胶,它能应用的范围广氨基巯基羟基都可以,而且合成的介质刚性好,非特异吸附少,所以不需要特殊处理未反应基团。此外键合的键很稳定,配基脱落少。是不错的选择。
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