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预染marker是怎么操作的呀?请问

相关实验:蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)

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dxy_leon9r48

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7 个回答

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biotides001

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各厂家都有说明书,可以参照说明书或者问师兄师姐

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whilt-shirt

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一般是直接加,可以设一个梯度摸索一下所需加的量

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未来9

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预染marker使用方法

1. 将蛋白分子量标准从冰箱取出,融化后轻轻混匀。

2. 离心后将分子量标准直接上样。

3. 印迹实验用量:mini-gel每次加4-6μl;full length-gel每次加8-12μl。

4. 电泳肉眼观察:mini-gel每次加10-15μl;full length-gel每次加20-30μl

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vae1476

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1.使用前请室温静置融化; 2.温和充分混匀,取5μl与实验样品同时进行SDS电泳。 3.未使用的彩虹预染marker按照储存条件要求保存。

操作说明 1.本产品可直接使用,不需加热。 2.及时更换电泳缓冲液并使用新配制的凝胶,以免影响电泳结果。 3.4°C可稳定保存3个月,如需保存更长

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bamboopiggy

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直接像样品一样上就好,但是不用上多了,每孔2-5ul就可以。

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府宅

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预染蛋白Marker是一些纯化较好的蛋白混合物,通过与染料共价偶联,在电泳过程中或者转膜时可以直接观察到。预染Marker的出现方便了我们的实验,这种蛋白分子量标准可以帮助我们在电泳时,电泳后,以及转膜后检测电泳情况和估计迁移率。值得注意的是预染蛋白Marker与染料共价偶联,所以在不同的缓冲条件下电泳时迁移特性可能会发生某些变化,可能导致一些偏差,所以不太适合精确定位蛋白。

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dxy_gwrp7ndq

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预染marker已经含有了样品缓冲液,使用前取分装后的小管65℃预热5分钟即可上样进行电泳,上样量5-10μl。建议分离胶浓度为10%.注意:上样前,蛋白样品65℃预热是必需的,否则电泳后一些蛋白会沉积在分离胶的上沿,出现一条蛋白杂带.

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