实验是个狗
样品一样,抗体相同,第二次WB结果跟第一次有出入。这种是什么原因,应该怎么避免,怎么才能尽可能让结果可重复??
未来9
问题出在每一步都有一定的可能性,比如电泳,转膜,敷抗体,显色等等。但据我所知,WB 最关键的还是转膜和敷抗体步骤,可能是你敷抗体的时候敷的不均匀。
bamboopiggy
上样用同一把枪,然后重复的结果只要趋势一致就好,不要想一模一样。样品处理好后,分装,避免反复冻融。
府宅
有效的样品制备是影响WB可重复性的非常重要的因素。可能是抗体质量差导致实验重复性不好,可以换抗体实验
dxy_gwrp7ndq
如果是细胞的话,重复性会好一些,基本没变化;但是如果是组织的话,因为个体差异明显,有时会出现结果不一致的情况,我们能做的就是尽量平衡,多做几次,数据多了,就会越接近真实结果了