凝胶过滤层析相关的问题

从冰箱里拿出来保存的葡聚糖凝胶，第二天用，还需要进行溶胀过夜吗？

样本本身杂质太多或者层析柱污染，都有可能造成这种情况

1　层析柱必须有柱头及分布器，即adaptor，紧压胶面完合没有空隙，否则样品上样受影响。

2　凝胶悬浮液不可太稠，否则很容易出气泡；太稀装柱时间过长，亦影响效果。50- 70%较适合。若是干粉，溶胀时间必须充足。装前完全搅匀。

3　一次性倒入层析柱中，容量不够则需加装柱器。切不可分几次倒，柱效和对称性都很难合格。

4　装柱及层析工作所用缓冲液的温度需一样。

5　柱底网下的气泡一定要除掉，可先用20%乙醇湿一下底网。

一般出现这种情况，是加入样品体积过多。

在样品过多（样品过载）的情况下，所有凝胶的孔隙被样品充满，样品就会在凝胶颗粒的空隙中通过，先形成一个样品峰，这个样品峰在出峰以后或者出峰的过程中，被凝胶吸附的样品也会脱附出峰，所以就会形成叠峰

感觉是你选的凝胶柱不合适，你最好换一个高分辨率的凝胶柱。或者是你的蛋白降解了，杂峰也会多。