wb的一抗该怎么选择，二抗是多个蛋白样品共用的吗

一抗一般选择兔来源的抗体，兔来源的抗体要稳定一些，二抗是根据一抗来定的，而且比较便宜，一般抗兔、抗小鼠都会备一点

一抗选择原则：

1. 先查一下该抗体的相关专业外文文献，先看看前人一般选择哪家公司的哪种抗体较多，且一定要根据期刊质量和图片结果好坏综合判断，提供参考；

2. 若未找到相关文献或查到的文献信息不详等原因，也可以通过公司查找，如Santa Cruz、CST、abcam、chemicon、upstate、millipore等知名品牌公司。其中磷酸化抗体优先考虑CST公司；

3. 种属反应性的选择（species reactivity）：对应抗体适合检测哪种种属动物体内的抗原，如Mouse、Rat、Human等。

4. 应用范围的选择：是用于Western blotting，或免疫组化IHC、免疫荧光IF、免疫沉淀IP等；甚至表明石蜡切片IHC-P或冰冻切片。

5. 单克隆和多克隆抗体的选择：由一种克隆产生的特异性抗体叫做单克隆抗体。单克隆抗体能目标明确地与单一的特异抗原决定簇结合，就像导弹精确地命中目标一样。另一方面，即使是同一个抗原决定簇，在机体内也可以由好几种克隆来产生抗体，形成好几种单克隆抗体混杂物，称为多克隆抗体。在抗原抗体反应中，一般单克隆抗体特异性强，但亲和力相对小，检测抗原灵敏度相对就低；而多克隆抗体特异性稍弱，但抗体的亲和力强，灵敏度高，但易出现杂带。我习惯选择多克隆抗体，因为考虑其它几个问题后。

6. 种属来源：Mouse、Rat、Human、Goat等，这与你实验室有哪种对应的二抗多来选择即可。

7. 生产厂家的选择：如santa Cruz公司一抗一般1 ml （浓度为200 ug/ml），价格1900-2100元，性价比较高，但相比其它著名公司，抗体投诉率较高；而CST、Abcam、chemicon等公司一抗一般100 ul （浓度为1 mg/ml），价格2000-4000元。

8.选择国产、国外原装、国外进口分装？我们组只要actin内参购买博士德或博奥森等公司；若一抗是课题组多位学生甚至长期持续做的话，建议购买国外原装；若仅仅某届同学做一次，建议进口分装，如中杉金桥

做 Western blot 实验，一抗非常非常重要。进口抗体一般不会出现问题。市场上知名的几家公 司，包括 ABCAM，Sigma，CST，Santa Cruz 等公司，质量都不错。

也可以根据相关文献来找合适的一抗。

二抗可以共用

一抗是针对你的蛋白来选的，二抗是看产生一抗的宿主是什么，只要都是同一物种的宿主，就可以共用，例如你的一抗都是兔抗的，二抗可以用抗兔的抗体一起加到膜上。