WB实验做完了，所有条带颜色都很浅怎么回事呀？

还有一种可能：是不夹板夹的不够严实，导致转膜不完整

个人感觉上样量低，计算一下是否在30到50之间

1、转膜没转好

2、上样量不够

3、一抗二抗浓度过低

1. 样本有没有问题？像楼上所说的原因

2.一抗二抗行不行？

你上样量是多少？如果连内参都很浅，考虑是上样量太少，如果有的地方深,有的浅，可能是转膜问题。还可以加大二抗的浓度试试。

蛋白量少？抗体浓度低？二抗？总之多试几个条件！你可以转膜后，用丽春红先预染看一下，转膜情况

1) 二抗的HRP 活性太强，将底物消耗光；

2) ECM底物中本身含双氧水，不稳定，见光或温度高时易失活；现配现用。

3) ECL底物没覆盖到相应位置；

4) 二抗时间过期，或平时使用不当导致二抗失活。

原因有好多，需要一一排除:

1，蛋白量太少，或者目的蛋白少

2，转膜没转上或者转过了

3，抗体浓度不够，或者特异性不强

4，显影液选用超敏显影液