请教一下，准备做coIP，抗体选择原则是什么？

直接登陆Thermo Fisher Scientific 官网的抗体主页：www.thermofisher.com/antibodies ，选择具体的实验应用(Application)，例如WB/IF/IHC/ICC/ELISA/FACS等

Tip：不同的实验对抗体的要求是不同的，一种抗体也有可能适用于多种用途。例如适用于Western Blot（WB）的抗体多数也适用于Dot blot、免疫组化（IHC）实验，因为都是用来检测变性的线性抗原；适用于ELISA的抗体多数也适用于免疫荧光（IF/ICC）、IP/Co-IP，因为都是用来检测天然构象抗原；然而适用于WB的抗体，不一定适用于IF/IP等实验，因此挑选抗体的时候一定要确认具体的实验用途。

1. 选择单克隆还是多克隆抗体？由一种B细胞产生的单一特异性抗体叫做单克隆抗体，单克隆抗体能目标明确地与单一特异抗原决定簇结合，就像导弹精确地命中目标一样。另一方面，即使是同一个抗原决定簇，在机体内也可以由好几种B细胞产生抗体，形成抗体混杂物，称为多克隆抗体。在抗原抗体反应中，一般单克隆抗体特异性强，但亲和力相对小、检测抗原灵敏度相对较低；而多克隆抗体特异性稍弱、抗体的亲和力强、灵敏度高，但易出现非特异性染色（实验时可以通过封闭等尽量避免非特异性染色）。

2. 抗体的种属来源。一般兔来源的抗体多是多克隆；而小鼠来源的抗体多是单克隆，但也有例外。抗体的来源这点非常重要，后面检测时带标记的二抗必须与一抗来源相匹配。

3. 实验目的是检测什么种属的抗原，即Species Reactivity。这一点很重要，一般说明书上都有注明，如小鼠Mouse、大鼠Rat、人Human等等，选购时尽量选择说明书上已经标注反应性的抗体。

4. 能否做免疫组化？一般一抗说明书都会注明是否能做WB、IHC、ICC、IF等，建议最好选择注明的抗体，因为一般都是经过实验验证的。

5. 检测标本类型。用户是检测石蜡切片还是冰冻切片，一般能做石蜡切片的抗体，都可以用来检测冰冻切片；但能做冰冻切片的抗体，不一定能检测石蜡切片中的抗原。

6. 价格与质量。进口抗体时间长，且价格高，很多都是国内厂家OEM的，科研型的抗体属于浓缩型抗体，需要多摸索几次实验条件，建立合适的实验条件后再进行大批量的实验，并且实验操作者的熟练程度、对实验的把控等对实验结果影响也很大，实验细节一定要把控好。另外，抗体切记避免反复冻融。

在进行Co-IP实验前，需要确认抗体可以用于Co-IP实验。在Co-IP实验中，抗体需要识别蛋白的构象表位，只能识别线性表位的抗体可能无法将靶蛋白沉淀出来，因此并不是所有的抗体都可以用于Co-IP实验。另外，用于IP靶蛋白的抗体与用于Weatern Blot检测目的蛋白的抗体最好是不同种属的，以避免抗体污染。