wb实验怎么选择抗体，设计实验能省一点钱呢？

看文献，看别人用的是什么抗体。首先保证作者的实验和你的实验差不多，也就是说你需要寻找能做WB的抗体的时候看别人做IHC的抗体是没有意义的；其次要看作者的Western blot检测的是内源蛋白还是过表达蛋白或者纯化的蛋白，一般来说，只有内源蛋白的Western blot才有参考意义，但是如果作者做了过表达的WB实验同时还做了干扰后的WB，则可以作为参考；最后要注意的是看作者的结论，并不是所有的作者对他使用的抗体都会有一个正面的评价，有的很可能是批评某家公司的抗体，也有的是把数家公司的抗体一一对照，所以一定要看仔细。 有一些文献中作者使用的抗体可能是他人赠送或者自己制备的，不妨发个邮件去或许能免费要一些回来使用。

1）确定抗体的名字，注意中英文名字、别名、亚型等信息。

（2）确定您的实验类型，Elisa，WB，IHC，ICC，或者是FACS。biorbyt的每种抗体说明书都会列出抗体经验证过适用的实验类型，如果抗体说明书没有提及的应用类型，并不意味着该抗体不适用于此种分析应用类型，而仅是说明尚未经过此种实验验证。

（3）确定实验样本的种属，Human，Mouse，Rat等。我们的抗体说明书都列出该抗体验证过的适用物种，可根据说明书列出已验证的种属来选择适合你实验需要的抗体。

（4）样本抗原蛋白的结构性质。了解样本抗原蛋白的结构性质有助于选择最合适的抗体，待测样本蛋白的结构域和样本在提取和处理过程中是否会变性，蛋白空间构象的改变，会影响抗体的免疫亲和反应。

（5）单多克隆抗体的选择。一般单克隆抗体特异性强，但亲和力相对小，检测抗原灵敏度相对就低；而多克隆抗体特异性稍弱，但抗体的亲和力强，灵敏度高，但易出现非特异性染色（可以通过封闭等避免）。

先通过文献找通路，然后可以申请试用装来做预实验，如果结果是想要的可以购买正装

使用第三方资源

一些机构，如CiteAb，提供了抗体引用的数据库。而另一些自己开展检测，并公开他们的数据。不过，尽管他们综合了大量的数据，但这往往来自单一来源，通常是二手的。因此，你需要检查这些信息是否与供应商网站上的一手数据一致。

5. 看看有没有试用装

许多公司现在提供小包装的抗体，让你大胆尝试，再决定是否购买大包装。这可是个好机会，既能验证抗体是否适合你的实验，又不用担心浪费太多钱。

6. 做好优化的准备

供应商的验证并不能完全取代内部的检验。你的样品不同，操作步骤也不完全相同。而这些因素都会影响抗体的表现，因此需要将你的western blot与抗体的验证分开而论。你的研究，最终还是需要你来把关。

7. 最终原则

无论你是采购还是使用抗体，你都必须记住抗体技术存在缺陷，它们可能会有变化。在选择抗体时需要严谨。尽可能使用阳性和阴性对照，控制你自己的偏见，确保你的western blot能提供正确的答案。

1.做预实验。2.尽可能的把蛋白条带的size错开。如果就几条带，可以把胶切小了，减少膜的用量。尽量切膜，加抗体，不要加全膜，除非实验必须。3.找公司申请抗体的试用装，或者找别的实验借。