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蛋白质复性的时候,为什么加入尿素可以增加溶解度,但是尿素会使蛋白质变性,这是为什么呢?

相关实验:蛋白质的层析纯化

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dxy_vmwkvot8

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3 个回答

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dxy_gwrp7ndq

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尿素能破坏氢键,导致蛋白质分子结构松弛,使蛋白质变性,使之蛋白质分子内部的疏水残基伸展和溶解性增加

天然蛋自质分子中的肽链以一定的方式盘绕曲折,形成特定的构象。这种构象的维持,主要依赖于蛋白质分子中的氢键。尿素能破坏氢键,导致蛋白质分子结构松弛,使蛋白质变性。尿素对球状蛋白质变性作用有两点,一是降低蛋白质非极性基因与水的疏水作用,二是尿素对蛋白质酰胺、肽基团的亲和力增强,这两个因素使蛋白质处于一种稳定的非折叠状态。

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府宅

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相似者相溶的原理,蛋白质中含肽键,尿素中含酰胺键,两种键本质上是一种,所以可以互溶。尿素的结构与蛋白质的肽基团颇为相似,在与蛋白质形成氢键时既可作质子供体,又可作质子受体,它与蛋白质形成氢键能力比水强,能破坏蛋白质分子内部氢键而致蛋白质变性。

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whilt-shirt

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尿素属中强度变性剂,易经透析和超滤除去。对包涵体(在某些生长条件下,大肠杆菌能积累某种特殊的生物大分子,它们致密地集聚在细胞内,或被膜包裹或形成无膜裸露结构,这种水不溶性的结构称为包涵体)氢键有较强的可逆性变性作用,所需浓度尿素8-10M。尿素溶解包涵体慢而弱,溶解度为70-90%,尿素在作用时间较长或温度较高时会裂解形成氰酸盐,对重组蛋白质的氨基进行共价修饰,但用尿素溶解具有不电离,呈中性,成本低,蛋白质复性后除去不会造成大量蛋白质沉淀以及溶解的包涵体可选用多种色谱法纯化等优点,故目前已被广泛采用。

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