WB最后显影的结果有非特异性条带，而且比目标条带颜色更深，怎么解决？

可以换用NC膜，减少蛋白吸附，降低背景；
封闭时间可以延长，过夜；一抗时间缩短，室温2个小时即可；
降低上样量和加大一抗稀释度；
延长冲洗时间和次数。

如果没有好的BSA就换为牛奶封闭试一下，效果可能好一点。

目的蛋白表达水平低，为检测到目的条带，需要提高上样量，结果中易出现杂带。

原因：一抗非特异性与蛋白结合

解决办法：更换一抗

此种情况绝大多数是因为一抗不好，如果实在没有更好的抗体，建议采用阴性对照和阳性对照来确定上述哪个条带是目的条带。当然这种情况下有一种很小几率的可能是一抗浓度太高引起的非特异性结合。