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input control是什么意思?

相关实验:免疫共沉淀(Co-IP)

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丁香实验

文章修回,审稿意见说免疫共沉淀(co-IP)缺少input control,请教各位大侠,input control是什么意思?是加入的样品量的对照吗?是不是加个 β-actin对照就行了?

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19 个回答

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医往情深丁香园

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就是裂解的蛋白原液,如果目的蛋白表达量正常,这个是很容易曝光出来的。
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内科小护士

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input control是对照的一种,在细胞裂完离心之后、加入抗体ip之前吸出来的细胞裂解液。可以在wb曝光时显示目的条带的位置以及比较不同泳道之间用于IP反应的细胞蛋白量。就是缺少一个对照,应该是加个对照就可以了。
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jey1235

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现在的input control已经不能简单使用目标蛋白的WB。 可以考虑将lysate跑一个SDS-PAGE然后考马斯亮蓝染色或者银染。给出整体的蛋白profile。然后再特意抗一下IP中的蛋白当作input。
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dxyhsx123

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input control个人理解,加一个与你目的蛋白大小相近的内参蛋白进行试验,应该就可以。
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ZZDX-YILILI

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input组一般包含anti-flag,anti-IgG.anti-目标蛋白抗体这样设置的才对。编辑意思应该是input目标抗体的IgG。
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verbalkint

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应该是缺个input,每个样品都要有一个自己的5%input,就是用于pulldown的蛋白总量的control,不然无法对比pulldown下来的蛋白量
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隔壁家的小夜猫子

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是呀,证明你放进去的蛋白量是一样的,全细胞和胞浆可以用tubulin,核的用组蛋白或者核纤层蛋白。
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dxy_bq4uxnd

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input control就是输入对照,主要是做wb检验表达是否成功的。
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dxy_h7vcp8v3

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input 对照就是 你自己刚把样品蛋白加入之后混匀取的样品,用来检测实验与对照加的样品量一致,排除后续实验与对照条带差异是加入蛋白样引起的差异。
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zxb597

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对照的一种,将需要进行免疫沉淀的样品,在加入抗体和树脂之前,先按比例取出一部分来,等到免疫沉淀完成后,上样检测前,再把input拿出来,一起进行后续的检测和操作
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dxy_pni5ki46

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input是要先证明你的初始样品中有你的要研究的两个蛋白,做两个蛋白的wb的时候都有input组,然后应该是都能做出对应的条带
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dxy_4uyyu09r

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input对照要有内参和目的蛋白,两个都要跑的!只是拿没有ip的蛋白做个对照而已!多做一次就搞定了
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z流沙z

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还要有一个IgG抗体的对照组,跟其他样品一样,只是加的抗体是和一抗相同种属来源的IgG抗体
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飞天幻雪

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input control是必须要做的,就是裂解的蛋白原液,如果目的蛋白表达量正常,这个是很容易曝光出来的。很简单的一个实验,祝你好运。早日发表
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dxy_w4oj7yoe

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不是啊,actin是内参,input是你和beads结合之前的蛋白液,是为了确定你的两个蛋白都在里面,以及他们的相对含量和纯度
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于小闹0808

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Input就是做CoIP时,细胞裂解后,抗体树脂加入前,预留出来的标本裂解液,在上样的时候,和处理完的样本,分泳道上样,作为阳性对照
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Guoood

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Input是指你做IP共孵育前,把刚提的总蛋白留出10-20ug,适量即可,用来做对照,表明总蛋白中也有目的蛋白。
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vae1476

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是指没有经过磁珠,不是拉出来的蛋白,而是未经处理的蛋白样本,以表征体系内存在该蛋白
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bamboopiggy

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你最好看看人家做co-ip的人是怎么显示结果的,他说的input control,是说你要用你的whole lysit s上一个泳道,就是你普通跑wb的样子,显示你的目的条带,和内参条带
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