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ELISA的样品稀释2000倍,这么大的稀释倍数是否要导致结果不准确?

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丁香实验

请问一下ELISA的样品稀释倍数有没有上限,我的样品的蛋白浓度过高,稀释成1%仍然超出了标曲的最大浓度范围,目测要稀释2000倍,这么大的稀释倍数是否要导致结果不准确,还是只要我操作加样合格,结果还是可信的?

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11 个回答

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颜渊溪桥

有帮助
建议按梯度倍数稀释样品,对照标准曲线,只要不超过标曲范围,检测结果是可信的。
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西柚味的芋圆

有帮助
应该要根据你自己查询的文献结果估算你要检测的特定蛋白在特定组织内的表达情况,然后来和说明书上标曲的范围来对照着看。超过标曲的浓度检测肯定是有问题的
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CXCR3

有帮助
样品稀释倍数没有上限。稀释倍数过大这种情况要看看样本原液是不是体积小或者出了问题。只要检测的吸光度不超过范围都没问题。如果不确定准确性,可以多个浓度先进行预实验。
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马小羊

有帮助
如果是你预实验摸过的稀释倍数,2000倍是有必要的,毕竟超出了标曲范围没法计算了。而2000倍也的确会把误差放大,所以我想说,源头上能看看什么原因吗?就是样品处理的实验上是否需要做下改进(怎么会到那么高的程度)
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peaceful13

有帮助
稀释倍数大没有关系,但是需要注意一下稀释的方法
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zgx3876

有帮助
可以稀释。但是最好进行一下样本是否有问题。一般情况下,多数血清血浆样本不需要稀释,32倍已经算是很高的稀释倍数了
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dxy_b4qu25j6

有帮助
一般来说样品的浓度应该稀释到标准品可测的范围之内,稀释多少倍应该没关系的
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dxy_0mxazdaw

有帮助
稀释倍数没有上限,因为只有在合适的检测范围内才能保证结果的准确性!同时,可以增加标准曲线的浓度范围,将原来的8个浓度增加到12个浓度,然后换一个拟合公示(如BD公司的CBA磁珠检测蛋白浓度里面会用到的公示)去计算,结果会准确很多。
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莹啊免疫啊

有帮助
稀释本身问题不太大,主要是你原始体积多少啊,原始体积好歹大于1mL,几微升什么的稀释2000,实际出来的浓度可能完全不对了,或者稀释完再用OD测一遍浓度, 最重要,查一下文献,看看别人的浓度也这么高吗,是不是你提取就出了问题,还是蛋白纯度有问题。怎么会高的这么离谱
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txs900416

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主要在于稀释的时候使用每次2倍或者10倍的倍比稀释,不要一次性稀释2000倍,这样的结果是准确的
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咸水鱼rain

有帮助
只要你检测的吸光度不超过检测范围,根据标曲就可以算出浓度,然后乘以你稀释的倍数就能得到原浓度,之前我有稀释过5000倍,只要标曲没有问题,操作没有问题,我觉得稀释倍数没有限制的
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