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虽然阳性样品能染出条带,但以前阳性质粒也没做出来,可能不会是转膜时间问题?

相关实验:蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)

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论文菌

目的蛋白是10K,没有目的蛋白的抗体。1 我同时转了GFP,确实有绿色荧光2 western时带了一个以前有阳性的样品,此样品55KD,能染出来3 转染细胞时转染了以前有阳性的质粒,但western这两个质粒均没有条带,这两个样品45k4 western还做了Aactin, 都有条带转膜我用300mA,45min,15min还没有试。虽然阳性样品能染出条带,但以前阳性质粒也没做出来,可能不会是转膜时间问题。老师,现在我不知道问题出在哪一步,希望老师予以指导
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