为什么 WB 有荧光，但曝光失败？

相关实验：蛋白质免疫印迹(Western Blot，WB)

guanshuli

2013-06-23

加ECL后荧光很强，但是胶片上却没有曝出来，求解答

11 个回答

fountain571

2013-07-11

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曝光液及两者混合问题

enpinghuang

2013-07-04

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1. 确定胶片没问题。2. 显影液、定影液没问题以及放入顺序。

abmicle

2013-07-04

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如果你是用老式的胶片曝光，那原因有两种：1 胶片被曝光了 2 背景太高，目的条带被掩盖

djzgood01

2013-07-01

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1.首先看看你的胶片有没有曝光（拿张空白的直接扔到显影液中看看）。 2.滴加的2抗浓度会不会太高，荧光一会就猝灭（2抗浓度降低点） 3.夹PVDF膜的镊子是不是生锈？铁锈也会影响（换个塑料的） 4.最后就是你的显影液啦、（一般用一周左右，或者换用质量好的）目前我们碰到的就这些问题，欢迎补充。。。

hgm100

2013-06-28

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显影液和定影液也有保质期？放错？再试一次？

wq701

2013-06-25

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1，显影液是否使用过多，失效？ 2，荧光太强，发生淬灭。一般是2。因为显影液如果到一点都显不出来的话，肯定很混了，LZ应该注意到，不会用了。 2我遇到过几次。荧光很强，很快淬灭。

yunzhongmanbu555

2013-06-25

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我觉得很可能是显影液的问题。新鲜的显影液应该是淡黄透明，如果变成酱油色就尽量别用了。以前我就遇到过这种情况，一换显影液，马上就可以显出了。

zq2008fish

2013-06-24

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可能的原因有： 1.操作过程中荧光淬灭，如用镊子夹膜，包保鲜膜等。 2.没有有效显影：如放错显影液，片子从压片夹拿出来后在投入定影液之前这个过程中曝光了等。 3.荧光过强，酶消耗过快，还没来得及压片子，荧光已经衰竭了。

雷神妹妹

2013-06-24

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恩，支持王老师的意见，而且显影液和定影液也有保质期哦，注意下。或者换用凝胶成像仪检测试试

yangweiwei

2013-06-24

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若显影定影没有问题的话，注意是不是用的保鲜膜有问题

王建勇

2013-06-24

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有没有注意曝光的时候是先放显影液，再放定影液，放错的话就会没有东西的出来的。