在GPP网站设计shRNA，序列第一个不是G要自己添加么，另外后面如果选三个，推荐的不是同一个载体，我可以用同一个么

一般不建议用同一载体，shRNA design指南里面有介绍用different sequence

在设计shRNA序列时，确实需要在第一个碱基前加上G，以确保转录过程中形成合适的启动子。在GPP网站中，你可以选择添加一个G或者使用原始的序列，它们在计算中会被自动纳入考虑。

对于选择不同的载体，这取决于你的实验需要和实验条件。如果两个载体的序列和构建方法相同，理论上它们应该是可以互换使用的。但是不同载体的表达效率和稳定性可能不同，因此最好先做一些控制实验以确保两个载体的性能一致。

G碱基是需要自己添加的，后面三个不建议用同一个载体，结合效率低