为什么在设计shRNA的时候，要在前面加G，看到好多都是确保RNA聚合酶转录，到底是怎么发生的呢

shRNA是一种RNA干扰技术，它可以通过靶向mRNA来抑制基因表达。在设计shRNA时，加入G可以增加shRNA的稳定性和效率。这是因为G可以形成一个三联碱基GNN，这个三联碱基可以增加shRNA的稳定性和效率。

因为G的稳定性最好，有利于转录，而其他碱基的稳定性差

在设计 shRNA（short hairpin RNA）的时候，在 shRNA 的5’端加上 G 的目的是为了确保 shRNA 能够被 RNA 聚合酶II转录，因为 RNA 聚合酶II 在转录 RNA 的时候需要一个 guanine (G) 核苷酸作为起始信号。如果 shRNA 的5’端没有 G，可能会导致 RNA 聚合酶无法将其转录，从而影响其表达和下游实验的结果。

另外，还有一些研究表明，加上 G 在 shRNA 的5’端也可以增加 shRNA 的稳定性，降低其被核酸内切酶（nucleases）降解的速度。

需要注意的是，虽然加上 G 可以提高 shRNA 的转录效率和稳定性，但是设计 shRNA 时需要避免 GGG 的重复序列，因为这可能会形成细胞毒性的 DNA 序列，从而影响实验结果。同时，shRNA 序列的设计也需要考虑目标基因的靶向性和特异性，以及对于非靶向基因的干扰程度等因素。