判断mRNA完整性问题

评估总RNA完整性的常用的方法是使用少量的RNA样品进行变性凝胶电泳并用溴化乙锭（EtBr）进行染色。虽然使用非变性凝胶电泳也是可以的，但其结果可能较难解读。RNA的二级结构会改变其在非变性凝胶中的迁移模式，从而使RNA不会按真实片段大小进行迁移。非变性环境同样会使条带不那么清晰，甚至会产生多条带分别对应于同一种RNA的不同结构。

完整的总RNA在进行变性凝胶电泳时会产生清晰的28S和18S rRNA条带（真核样品）。28S rRNA条带的强度应当大致为18S rRNA条带的两倍。这种2:1的比率（28S：18S）是判断RNA完整性的一个很好的指标。

通过琼脂糖凝胶电泳验证RNA完整度。

可以通过以下指标进行判断：

① RNA完整度。

② RNA的纯度。