求教：lnc RNA干预载体的构建？

1. 选择合适的载体，依据实验室现有的条件进行选择：plvx-puro，Amp，puro，其他慢病毒载体的原理相似，例如pLenti-puro等

2. 找到基因的CDS区，复制；对于LncRNA，则直接选择全部序列即可

3. 用primer5找到目的基因上没有and载体有的酶切位点

4. 确定酶切效率，在酶边是否需要加保护碱基以提高效率

5. Kozak序列（针对表达蛋白的载体，而对于L过表达载体，则不需要RNA）

6. 取目的基因CDS区两端15~21个碱基（或反向互补链），加上酶切位点和kozak。当然，这个范围可以放宽。