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RNA酶如何灭活

相关实验:RNA- 蛋白复合物中寡核苷酸靶向的RNaseH切割保护实验

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ly879752577

想脑室注射siRNA,客服建议高温干烤(干热灭菌法),如果实验室条件达不到还有其他方法吗?

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6 个回答

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Topmicro

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采用0.1%的DEPC溶液浸泡实验器材,通风橱是室温过夜处理,然后灭灭菌锅121摄氏度灭菌30min以上,再烘箱烘干就行。

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bamboopiggy

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高压灭菌一般实验室都能做吧?实在不行,买一次性的耗材吧

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whilt-shirt

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这种情况可以试试高压蒸汽灭菌,但不保证能用

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大草原的小灰驴

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焦碳酸二乙酯(DEPC)处理是灭活水和缓冲液中RNase最常用的方法。不过,包括Tris在内的某些试剂不能使用DEPC进行处理。

DEPC处理是消除水体、缓冲液及其他溶液中RNase污染最为常用的方法。(注意:某些缓冲液不能使用DEPC)DEPC能够通过修饰RNase及其他蛋白中的-NH、-SH和-OH基团来破坏酶的活性。处理步骤通常包括将溶液与0.1%的DEPC在室温下共同孵育数小时——通常过夜——之后对溶液进行高压处理以去除残余的DEPC。

在体外转录、反转录和翻译等酶促反应中对抗RNase的传统方法是使用人类胎盘核糖核酸酶抑制剂(也称为RNase抑制剂蛋白,RI或hPRI)。这一蛋白仅针对核酸酶当中的RNAase A家族具有抑制性,该家族的成员包括RNase A、B和C。该抑制的模式为非竞争性的,即该蛋白并不会破坏这些RNase,而只是与其按1:1的比例结合。因此使用该抑制剂一个潜在的问题是其自身也可能被RNase污染。长时间与存在污染的抑制剂共同孵育,有可能会向酶促反应系统中缓慢释放核酸酶。因此,尽管这种抑制剂有助于解决多种核酸酶污染的情况,它并不一定是现有的最佳抑制剂。

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Eason老歌迷

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如果想要灭活实验器材上的rna酶,拿depc水提前浸泡即可

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你好几和户

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加入RNA酶抑制剂,RNA酶的蛋白抑制剂(RNasin)。

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