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RNA- 蛋白复合物中寡核苷酸靶向的RNaseH切割保护实验

实验分类:

RNA 实验

最新修订时间:

简介

寡核苷酸靶向的 RNase Ⅱ 酶解实验是分析 RNA 蛋合复合物(RNP,核糖核蛋白颗粒)的方法,无论是对于粗提物还是提纯后的样品,对分析 RNP 的结构域的结构都非常有效。本实验来源「RNA 实验指导手册」主编:郑晓飞。

来源:丁香实验

操作方法

RNA-蛋白复合物中寡核苷酸靶向的RNaseH切割保护实验

一、材料与设备 所有的缓冲液和溶液必须无 RNA 酶污染。 1. RNP 制备和 DEAE 层析 (1) 缓冲液 D : 20 mmol/L HEPES ( pH 8.0 ),100 mmol/L KCl,0.2 mmol/L EDTA。20% 甘油,高压灭菌。在使用前加 DTT 至 1 mmol/L。加苯甲磺酰氟(PMSF)至 0.1 mmol/L。 (2) DEAE-Sepharose

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