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怎样减少值 RNA 酶污染的机会?

相关实验:RNA 干扰技术

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tree2013

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3 个回答

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dxy_gwrp7ndq

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必须确保与纯化的rna接触的每一样东西都是无rnase污染的。所有的表面,包括移液器、工作台、玻璃器皿和制胶设备,都必须用表面去污净化溶液如rnase喷雾清除剂处理过,去除各种溶液或者反应缓冲液中可能存在的rnase污染,可以用rnasafe。必须保证一直使用无rnase的枪头、试管和溶液,手套也应经常更换。

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迟C迟

有帮助

1.经常更换新手套。因为皮肤经常带有细菌,可能导致RNase污染。

2.使用RNase-Free的塑料制品和枪头避免交叉污染。

3.RNA在TRNzol Universal试剂中时不会被RNase降解。但提取后继续处理过程中应使用 RNase-Free的塑料和玻璃器皿。玻璃器皿可在150℃烘烤4h,塑料器皿可在0.5 M NaOH 中浸泡10 min,然后用水彻底清洗,再灭菌,即可去除RNase。

4.配制溶液应使用RNase-Free ddH2O。(将水加入到干净的玻璃瓶中,加入DEPC至终浓度0.1%(V/V,放置过夜,高压灭菌)。

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dxywode

有帮助
RNA酶催化的反应一般不需要辅助因子,因而RNA制剂中只要存在少量的RNA酶就会引起RNA在制备与分析过程中的降解,进而直接影响RNA分析结果。在所有RNA实验中,核糖核酸酶(RNA酶)的污染是导致实验失败的主要原因。因此,在RNA的制备与分析操作实验中,要严格防止RNA酶的污染。在RNA提取实验前对器材及试剂的处理非常的关键。焦碳酸二乙酯(DEPC)是一种强烈的RNA酶抑制剂,其通过和RNA酶的活性基团组氨酸的咪唑环结合使RNA酶变性,从而抑制RNA酶的活性。
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