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必须确保与纯化的rna接触的每一样东西都是无rnase污染的。所有的表面,包括移液器、工作台、玻璃器皿和制胶设备,都必须用表面去污净化溶液如rnase喷雾清除剂处理过,去除各种溶液或者反应缓冲液中可能存在的rnase污染,可以用rnasafe。必须保证一直使用无rnase的枪头、试管和溶液,手套也应经常更换。
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1.经常更换新手套。因为皮肤经常带有细菌,可能导致RNase污染。
2.使用RNase-Free的塑料制品和枪头避免交叉污染。
3.RNA在TRNzol Universal试剂中时不会被RNase降解。但提取后继续处理过程中应使用 RNase-Free的塑料和玻璃器皿。玻璃器皿可在150℃烘烤4h,塑料器皿可在0.5 M NaOH 中浸泡10 min,然后用水彻底清洗,再灭菌,即可去除RNase。
4.配制溶液应使用RNase-Free ddH2O。(将水加入到干净的玻璃瓶中,加入DEPC至终浓度0.1%(V/V,放置过夜,高压灭菌)。
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