Neough
提DNA或者RNA会不会产生大量气溶胶,在同一个地方加样做qpcr,会对qpcr的结果产生影响呢
skyye
这个影响不大吧?现在很多都用试剂盒提取RNA了,一般不会影响qPCR的,但如果用Trizol的话需要在通风橱,做qPCR的话就在实验台就行,注意无酶操作
高山云初
会产生气溶胶,尽量避免在同一地方做
dxy_xextz7w2
可以的,对qpcr的结果不会产生很大的影响
粥辰辰辰辰
可以。但Qpcr是为了基因表达定量,所以要确保引物扩出来的是你想要的片段。如果上下游引物都在同一个外显子,可能会以RNA提取时残留的基因组DNA作为模板进行扩增,导致实验数据不准确。如果一定要在同一外显子,那么在设计引物之后一定要通过软件预测一下是否会出现非特异扩增(当然,跨外显子的也是要的)
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可以在同一个地方提DNA或者RNA做qpCR的
小小翻车鱼
在提取DNA或RNA的过程中,可能会产生一定量的气溶胶。这些气溶胶主要来源于样本的裂解和核酸纯化过程中的离心操作,尽管气溶胶中可能含有微量的核酸,但在大多数情况下,其浓度不足以对后续的qPCR实验产生显著影响。
然而,在实验过程中,尽量减少气溶胶产生是值得推荐的。以下是一些建议,以降低气溶胶对qPCR实验的影响:
1. 在提取过程中,尽量在生物安全柜(BSC)或其他合适的通风设备中进行操作。这可以有效减少气溶胶扩散到实验室空气中。
2. 在加样进行qPCR之前,对离心后的核酸样品进行短暂的离心,以去除可能附着在管壁上的气溶胶。
3. 使用滤芯过滤器或柱式过滤器对核酸样品进行过滤,以去除可能存在的微量气溶胶。
4. 在加样进行qPCR时,确保使用新的加样器吸头,以避免交叉污染。
5. 使用优质、无RNA酶和DNA酶的实验室耗材,以降低污染风险。
虽然提取DNA或RNA可能会产生一定量的气溶胶,但在采取适当预防措施的情况下,其对qPCR实验结果的影响通常是可以忽略的。同时,实验过程中,应注意保持良好的实验习惯和操作规范,以降低气溶胶对实验结果的影响。
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