请问qpcr扩增曲线溶解曲线都是锯齿状的是什么原因啊？

实验操作问题：PCR反应管没有盖紧，反应液泄露；PCR反应液有挂壁

模板问题：RNA纯度低，扩增信号太弱

仪器本身的问题：长时间未校正，荧光不稳定；使用过度，荧光收集不稳定

考虑可能是ROX添加不当导致的异常结果。可以尝试去掉ROX分析数据，看一下重复性是否OK（复孔间STD<0.2），如果还是不行，只能下次实验的时候注意千万不要加错ROX。

荧光信号采集不当，多次采集信号（或未采集荧光信号）。

锯齿状无非是下面几个原因

1、荧光值不高，比如没有起峰时纵坐标间距较小，一点点的波动就能反应出来，当起峰后，纵坐标比例显示的范围变大，所以会将本地压平。如果你荧光值不高时会出现锯齿状

2、pcr仪器温度不稳定，或者没有稳压电源

3、pcr反应管没有盖紧，反应液泄露

4、pcr反应液有挂壁