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请问我的目的产物在2176bp,以DNA为模板的时候PCR扩增,普通酶,延伸时间应该设置多久呢?

相关实验:长片段PCR实验

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dxy_rbusixu0

以cDNA为模板扩增是多少呢?有没有大佬知道,求解答

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3 个回答

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晓雨知春来

有帮助

延伸时间通常为每1-2Kb/分钟。应该根据目的产物的长度,将延伸时间设置适当延长。

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毛利小五郎的徒弟

有帮助

延伸时间一般设置为1-2kb/min即可

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loveliufudan

有帮助

PCR扩增的延伸时间会受到多个因素的影响,包括模板 DNA 的长度、扩增目的产物的大小以及所使用的 DNA 聚合酶的性能。一般来说,对于一般大小的 PCR 产物(如您提到的2176 bp),延伸时间通常为每kb 1-2分钟。

因此,根据目的产物的长度,您可以将延伸时间设置为大约 2.2-4.4 分钟。这是一个起点,您可以根据实验的结果进行优化调整。

另外,延伸时间也可以通过进行温度梯度试验或扩增时间渐进增加的方法来确定最佳的延伸时间。这些方法可以帮助您确定在特定实验条件下产生最佳 PCR 扩增结果的延伸时间。

最后,还要注意选择合适的 DNA 聚合酶,确保其具有足够的扩增能力和适合您实验条件的延伸速率。


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