pcr不起峰是什么原因

pcr不起峰可能有以下原因：

1.非特异性引物结合，建议更换引物

2.细菌支原体污染，建议消毒灭菌

3.DNA降解，建议更换DNA，去除降解因素

PCR不出现特定的放大产物峰可能由以下原因引起：

1. 引物问题：引物是PCR反应中的关键组成部分。如果引物设计不当，可能会导致PCR不起峰或产物低效。检查引物序列是否正确，长度是否合适，是否存在互补、自身二聚等问题。

2. DNA模板问题：DNA模板可能存在质量问题，如降解、含有PCR抑制物质或浓度过低。检查DNA提取过程、保存条件和质量，确保模板DNA的质量良好且浓度适宜。

3. PCR条件问题：PCR反应的温度、时间和酶的浓度等条件可能需要优化。确保PCR反应的温度梯度适当，酶浓度合适，扩增循环的时间和次数充足。

4. 反应物质污染：PCR反应过程中可能存在外源性污染物，如核酸酶、细胞残余物、DNA污染等。在操作PCR实验室时，严格控制无菌操作，避免污染源。

5. 扩增产物检测问题：可能是检测方法或条件的问题，如电泳条件不正确、染料浓度不足或检测系统故障。确保电泳条件正确，使用适量的染料，并检查电泳系统的运行状态。

荧光定量pcr溶解曲线没有峰是因为：一般每加温一度，读一次信号，当温度到达PCR产物的Tm时，产物解离一下增多，曲线的横坐标是温度，纵坐标是荧光信号的变化，开始加热，信号变化不大，所以几乎是平的。