大可姑娘
师兄教我的是先配成100uM,再分别去正向和反向引物10ul+980ul无酶水,配成1uM的引物
经常使用的避免反复冻融可以放4℃,大概放了一个月,昨天跑qPCR发现之前是单峰的出现了双峰
重新配了10uM的引物体系来跑,就还是单峰
那引物放在4℃最多多久呢?
1uM引物保存靠谱不?
sswei
引物合成后,经过一系列处理和纯化步骤,旋转干燥而成片状物质。没有溶解的引物非常稳定,-20℃下可保存2-3年,甚至更长。溶解后的引物-20℃下避免反复冻融,可以保存至少半年以上。如果对实验的重复性要求较高,合成的OD值较大,建议将溶解好的引物事先稀释为100μmol/L的储存液,分装数份保存于-20℃冰箱。使用前,将浓溶液稀释成工作液(10pmol/μl或20pmol/μl)后进行实验。修饰荧光引物需要避光保存。
huarenqiang5
引物在4度可以保存半年左右没什么太大问题。
loveliufudan
一般来说,正确保存的引物在4°C下可以保持较长时间的稳定性,通常可以保存数月至一年。然而,引物的保存时间也会受到其他因素的影响,例如引物的序列和纯度,以及是否有受污染的可能性等。
单峰引物在存放期间出现双峰的情况可能是由于引物降解或污染导致的。即使在4°C下保存,引物仍可能受到一定程度的降解,特别是当引物的序列较长或存在易降解的结构时。此外,引物在保存期间也可能受到污染,例如DNA酶的污染。
为了确保引物的可靠性和一致性,建议定期检查引物的质量,并遵循以下建议:
1. 存储条件:将引物以无菌的方式分装成适当的工作浓度(如10 μM),避免反复冻融。将其保存在-20°C或更低的温度下可以更好地保护引物的稳定性。如果只在短时间内使用,可以将适量的工作浓度引物放在4°C冰箱中。
2. 避免污染:在使用引物之前,确保工作区域和使用工具都是无菌的。避免接触引物管的内壁和盖子,以减少污染的可能性。同时,尽量避免引物与其他实验样品接触。
3. 定期检查引物质量:定期进行引物质量检查是很重要的。可以使用比色法、凝胶电泳或其他适当的方法来评估引物的纯度和完整性。如果发现引物出现异常,如双峰的情况,最好重新配制新的引物。
总之,保存在4°C下的引物可以在适当的条件下保持相对稳定的时间。但为了确保引物质量的一致性和准确性,定期检查引物并遵循适当的保存和操作方法是必要的。
土井挞克树
4摄氏度一个月以后会出现降解可能,然后出现双峰
相关产品推荐
相关问答