定点突变之后同源重组完毕，电泳显示有条带，为什么转化后的板子不长菌落

转化的时候有误，可以重新实验。目的基因和载体都切开，特别是目的基因如果是PCR后直接酶切效率会较低；载体上两个酶切位点连在一起，感受态的效率问题，转化过程对不对，如抗生素加的对不对。

考虑是纯化过程没有做好，Dpn1消化后，使用纯化试剂盒后纯化一下，然后用异丙醇再纯化一遍

如果在转化后的板子上未能长出菌落，可能有以下几种原因：

宿主细胞对重组体不敏感：有些宿主细胞对重组体的生长和繁殖不敏感，可能会导致重组体不能在转化板上生长。可以尝试使用不同种类的宿主细胞进行转化，以找到适合重组体生长和繁殖的宿主。

转化过程中重组体受到损伤：在转化过程中，重组体可能会受到电击、化学药剂或其他因素的损伤，导致其不能在转化板上生长。可以尝试优化转化条件，包括电击电压和时间、化学药剂的浓度和处理时间等。

质粒或DNA的质量不好：质粒或DNA的质量不好可能会影响重组体的稳定性和完整性，从而导致不能在转化板上生长。可以尝试使用高质量的质粒或DNA进行转化，或对质粒或DNA进行纯化和检测。

菌落被其他细菌污染：转化板在转化过程中可能会被其他细菌污染，导致重组体不能在转化板上生长。可以尝试使用无菌的转化板和操作环境，并加入适当的抗生素进行筛选和鉴定。